طرق تعقيم بيئات زراعة الأنسجة
إن المتطلب الرئيس لنجاح زراعة الأنسجة هو البيئة المعقمة، حيث تقوم الميكروبات بإلحاق الضرر بالأنسجة، بالإضافة إلى إضاعة الوقت والجهد والمال المبذول، ولذلك يجب التخلص من هذه الميكروبات عن طريق طرق تعقيم البيئات الخاصة بزراعة الأنسجة، وهي كما يلي:
جهاز التعقيم بالبخار عالي الضغط
يستخدم جهاز التعقيم بالبخار عالي الضغط (بالإنجليزية: Autaoclave) لقتل الفيروسات والبكتيريا وأبواغ الكائنات الحية الدقيقة، وذلك عن طريق وضع المواد المراد تعقيمها داخل الجهاز الذي يعمل على رفع درجة الحرارة لتصل إلى 121.6 درجة مئوية تحت ضغط بخار مرتفع، بحيث تحدث الرطوبة في البخار تغييرات في بنية بروتينات الكائنات الحية الدقيقة.
وتستخدم هذه الأجهزة عادةً في تعقيم الأدوات الزجاجية، و الماء المقطر ، والمحاليل الملحية، وأوساط النمو الصلبة والسائلة، بالإضافة إلى تعقيم وسائط نمو الأنسجة الملوثة أو المراد التخلص منها.
فرن الهواء الساخن
يستخدم فرن الهواء الساخن (بالإنجليزية: Hot Air Oven) لتعقيم المواد المخبرية عن طريق تعريض البكتيريا والأبواغ لدرجات الحرارة وقتلها عن طريق تجفيفها، بحيث تتم عملية التعقيم على درجة حرارة 170 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، أو على درجة حرارة 160 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة، أو على درجة حرارة 150 درجة مئوية لمدة 150 دقيقة.
يمكن من خلال فرن الهواء الساخن تعقيم المواد الصلبة المسحوقة والأواني الزجاجية والمواد المعدنية، ويجب الانتباه إلى عدم استخدام المواد التي تنصهر على درجات الحرارة العالية.
التعقيم بالترشيح
تستخدم هذه الطريقة لتعقيم بعض مكونات أوساط النمو التي تتغير أو يثبط مفعولها عند تعرضها للحرارة، وتتم عملية الترشيح باستخدام حقنة يركب عليها غشاء مرشح، إذ يدفع المحلول المراد تعقيمه عبر غشاء الترشيح الذي لا يزيد حجم مسامه عن 0.2 ميكرون ليقوم بتصفية الكائنات الحية الدقيقة التي يزيد حجمها عن قطر مسام المرشح.
تعقيم الهواء
يعقم الهواء الذي تتعرض له المواد المستخدمة في زراعة الأنسجة عن طريق استخدام حجرة التدفق الصفحي (بالإنجليزية: Laminar Flow Cabinets)، وهي أجهزة تحتوي على فلاتر تمنع تدفق الفطريات والبكتيريا والغبار الموجودة في الهواء عادةً إلى الأنسجة المزروعة والأدوات المستخدمة.
التعقيم الإشعاعي
تستخدم هذه الطريقة كل من؛ الأشعة السينية وأشعة جاما والأشعة فوق البنفسجية في التعقيم، وتختلف هذه الإشعاعات في قدرتها على اختراق المواد، وتعد الأشعة فوق البنفسجية هي الأكثر أمانًا وأقل قدرة على الاختراق، بحيث تستخدم في تعقيم المساحات الصغيرة كالأجزاء الداخلية لحجرات السلامة البيولوجية.
في حين تستخدم أشعة جاما في تعقيم المعدات الطبية التي تستخدم لمرة واحدة كالحقن، وتستخدم الأشعة السينية في تعقيم العبوات الكبيرة ومنصات تحميل الأجهزة الطبية.
التعقيم الكيماوي
يمكن استخدام المواد الكيماوية في التعقيم عند انعدام القدرة على استخدام الحرارة، حيث تتضمن هذه المواد بعض أنواع الغازات والسوائل التي لا تؤثر على المواد المراد تعقيمها، وتشمل الغازات الكيماوية المستخدمة للتعقيم غاز الأوزون، أو مزيج من أكسيد الإيثيلين وثاني أكسيد الكربون.
ومن المواد الأخرى المستخدمة في التعقيم؛ الفثالالدهي، و بيروكسيد الهيدروجين ، وحمض البيراسيتيك، وثاني أكسيد النيتروجين، ومحاليل الجلوتارالدهيد والفورمالديهايد، كما يمكن استخدام الإيثانول الذي يقتل الخلايا الميكروبية ولكنه لا يؤثر على الأبواغ.
