طرق زراعة الأنسجة الحيوانية
فيما يأتي طرق زراعة الخلايا الحيوانية :
زراعة الخلايا الأوليّة
تؤخذ هذه الخلايا مباشرة من الأنسجة والأعضاء بطريقتين هما التفكك الميكانيكي أو الكيميائي ويُمكن أيضاً باستخدام الهضم الأنزيمي، يتم تحفيز هذه الخلايا على النمو في عبوات زجاجيّة أو بلاستيكيّة مناسبة ويتم وضع وسط ملائم لها لتحفزها على النمو، يُفضل العلماء هذه الطريقة لأنها أكثر تمثيلاً لأنواع الخلايا في الأنسجة التي أُخذت منها رغم أنّ معدل النمو فيها منخفض وغير متجانس.
زراعة الخلايا الثانويّة
يتم أخذ عينة من مزارع الخلايا الأوليّة وزراعتها في وسط آخر فإنّها تنمو لفترة زمنية طويلة، فتتكون مزارع ثانوية من المزارع الأولية تبقى لفترة طويلة على عكس خلايا مزارع الخلايا الأوليّة، وذلك بسبب التغذية المستمرة من العناصر الغذائيّة على فترات منتظمة.
يتم نقل الخلايا إلى المزارع الثانوية عن طريق الهضم الأنزيمي للخلايا، يتبع ذلك غسل وإعادة تعليق للكميّة المطلوبة من الخلايا في أحجام مناسبة، يُفضل بعض العلماء مزارع الخلايا الثانويّة لأنها سهلة النمو ومتاحة بسهولة تُستخدم بشكل واسع في البحوث الفيروسية والمناعية.
خطوط نمو الخلايا
يتم تقسيم أنواع الخلايا اعتمادا على عمر الخلية المزروعة إلى نوعين وهما كالآتي:
تُسمى خطوط هذه الخلايا بالمحدودة لأنها تحتوي على عدد محدود من الخلايا وتنمو الخلايا في خطوط محدودة، حيث تنمو الخلايا ببطء فتستغرق من 24 إلى 96 ساعة، تتميز هذه الخلايا بأنّ نمو الخلايا فيها غير كثيف.
يتم الحصول عليها من خطوط الخلايا المحولة في المختبر أو الخلايا السرطانيّة، وهي خطوط غير محددة حيث يمكن زراعتها بشكل أُحادي الطبقة أو معلقة، حيث تنقسم هذه الخلايا بسرعة فتستغرق من 12 إلى 14 ساعة ويمكن تربيتها إلى أجل غير مسمى، قد تظهر خطوط هذه الخلايا اختلال شكل الكروموسومات أو تغير في عدد الكروموسومات.
في الوقت الحاضر ومع التقدم في تقنية زراعة الخلايا الحيوانية، تم تطوير عدد من خطوط الخلايا حيث تُستخدم لإنتاج اللقاح والبروتينات العلاجيّة والمنتجات الصيدلانيّة والمواد المضادة للسرطان، يفضل استخدام خطوط الخلايا القادرة على النمو عن طريق التعليق لأنها تتمتع بمعدل نمو أسرع، فيعد مبيض الهامستر الصيني هو الخط الخلوي الأكثر استخداما في الثدييات.
متطلبات النمو
يُعتبر الوسط المستخدم لزراعة الخلايا معقد جدًا ويختلف بشكل كبير وذلك تبعاً لنوع الخلايا المستخدمة، فهي بشكل عام تشتمل على الأحماض الأمينيّة والفيتامينات والأملاح لتحافظ على الضغط الأسموزي والجلوكوز ونظام عازل للبيكربونات ليُحافظ على درجة الحموضة بين 7.2 و 7.4، وتحتوي أيضاً على الهرمونات والأكسجين وثاني أكسيد الكربون لتحسين معدل نمو الخلايا.
يعد من الضروري إضافة كمية صغيرة من مصل الدم، وإضافة العديد من المضادات الحيويّة مثل البنسلين والستربتومايسين لمنع التلوث الجرثومي، وتختلف درجة الحرارة المستخدمة تبعاً لنوع الخلايا ففي خلايا الثديات تنمو عند 37 درجة مئوية بينما تنمو الخلايا المأخوذة من الحيوانات ذوات الدم البارد على درجة حرارة من 15 إلى 26 درجة مئوية.
